免疫荧光染色!

    这个实验步骤的结果,将掲示最终的答案。

    若是结合,那彭月娇的怪病,或许有了新的转机。

    但如果没有发生结合……恐怕所有人都会再次茫然,研究也将陷入新的怪圈之中!

    此刻,即便是莫雷蒂,心情都有些紧张了。

    而许秋则依旧平静。

    并且,荧光染色的步骤,也经过了他的改良。

    相比于常规的“单张玻片仅包被一种抗原”做法,许秋采取的方案,是用聚赖氨酸包被玻片用疏水笔划分三区,三区分别包被活菌、热灭活菌以及1tritonx-100裂解菌。

    这种做法的优势很大。

    一来,可以消除玻片表面性质差异导致的结合偏差。

    二则是能够同时展示抗原构象变化对结合的影响。

    从活菌,到热灭活菌,再到利用去污剂tritonx-100裂解细胞组织获得蛋白的裂解菌液……

    说得直白一点,活菌就是全活,热灭活菌就是活一半,而裂解菌则是全死……后者的作用,是用于确定结合只发生在热灭活菌暴露的抗原表位之上。

    而且在进行荧光标记时,许秋也微调了所用材料。

    此前,他们用的是fitc标记。

    它激发488n,很容易与组织自发荧光混淆。

    毕竟生物样本中最常见的自发荧光就是绿色,与fitc标记高度重合,很容易认错。

    而许秋,则换成了alexafor594标记。

    这种标记,激发在590n,而且颜色为红色!

    几乎不会与自发荧光混淆!

    “太细节了……”

    “连荧光的激发与自发荧光混淆都考虑到了?”

    “我之前一直用的fitc标记,有几次碰到的荧光反应很强烈,还以为是出成果了,后来才发现是样本中的脂褐素自己在发光……给我白高兴一场!”

    “换用alexafor594,则能完全避免这个问题!”

    莫雷蒂等人惊叹不已。

    而邱伟、张骁等科研人员,则是更加振奋。

    这便是他们不愿意错过许秋的实操研究的原因了。

    许秋的手术堪称完美。

    而他做研究,也讲究精雕细琢。

    很多细节上的处理,都极为巧妙。

    作为科研人员的他们,看得爽是一回事,另外的关键在于——他们也能借此得到感悟,将同样的手法用在往后的科研之中!

    这才是最大的裨益!

    ……

    而在众人目不转睛的注视之中,实验终于到了最后阶段。

    荧光染色完成。

    接着,是用iaj量化荧光强度,通过对比roi内平均像素值,比较三个区域的结合差异。

    所有人都紧张起来。

    就连莫雷蒂,都有种手心冒汗的感觉!

    这个结果,将决定今晚的努力是否白费了。

    许秋的动作却很快。

    他直接就开始对比三个区域。

    当看到结果时,所有人的眼睛都瞪大了。

    活菌区,依旧呈现出微弱非特异性荧光,且平均强度小于15au。

    而1tritonx-100裂解菌区域,则完全无荧光,意味着无结合。

    而中心区域,热灭活菌区,强烈的荧光信号仿佛是一轮诞生于载玻片上的太阳,极其醒目,且平均强度甚至达到了182au!

    足可见结合之激烈!

    这一刻,所有人都振奋起来。

    “果然……发生了特异性结合!”

    “这可比当时埃米尔教授的偶然结合要强烈多了!”

    “物化协同,采取β-巯基乙醇还原菌体表面蛋白,释放了被遮蔽的抗原决定簇……这让结合更加顺利地发生!完全是点睛之笔!”